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LPS在不同模型的應用和誘導不同疾病模型的protocol

更新時間:2023-12-18   點擊次數:1085次

炎癥作為機體免疫應答的重要機制之一,一直是生命科學研究的熱點方向,LPS(脂多糖)由于易于控制,模型重現性好,影響易于識別和測量等優勢,成為建立急性炎癥模型的金標準試劑。


LPS由一個多糖區域組成,該區域由被稱為脂質A的特定糖脂部分錨定在細菌外膜上。脂質A是一種與羥基脂肪酸相連的葡萄糖胺雙糖,羥基脂肪酸進一步被非羥基脂肪酸取代。脂肪酸的數量是內毒素免疫原性的主要決定因素。最-活-躍的脂質A含有6個脂肪酰基,存在于大腸桿菌和沙門氏菌等致病菌中。含有4或5種脂肪酸的低酰化脂質A,誘導宿主防御反應明顯減少,并能以劑量依賴的方式抑制六酰化脂多糖引發的強烈內毒素反應。





LPS作用機制原理圖

 LPS在不同模型的應用和誘導不同疾病模型的protocol

-Cohen J. The immunopathogenesis of sepsis. Nature. 2002 Dec 19-26;420(6917):885-91. PMID: 12490963.



現總結LPS在不同模型的應用和

誘導不同疾病模型的protocol供研究者參考:




LPS誘導疾病模型

模型
產品
給藥方式
PMID
小鼠急性肺損傷模型
LPS-EB (Standard)
氣管內給藥10 μg
35544597
應用:Reg1-MO抑制LPS誘導的急性肺部炎癥。
LPS-EB Ultrapure
氣管內給藥200μg/kg BW
24007300
應用:NLRP3炎癥小體是LPS/機械通氣急性肺損傷低氧血癥發生發展所必需的
LPS-EB Ultrapure
氣管內給藥200 μg/kg BW
32117318
應用:自噬通過下調LPS和機械通氣誘導的急性肺損傷中的炎癥小體活性和IL-1β來防止肺通透性增加和低氧血癥。
小鼠炎癥小體激活
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射20 mg/kg BW
33017103
注:引自“Current Protocols in Immunology",為非經典NLPR3炎癥小體激活提供了詳細的實驗方案
小鼠膿毒癥模型
LPS-EB  (Standard)
腹腔注射18mg/kg BW
31779628
應用:Poldip2 介導 LPS 誘導的膿毒癥相關性腦病模型中的血腦屏障破壞。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射6mg/kg BW
30808756
LPS-EB VacciGradeTM
腹腔注射50mg/kg BW
應用:西方飲食調節小鼠免疫狀態和對LPS引發的膿毒癥的反應。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射5mg/kg BW
36586274
應用:潛在生物標志物TIFA通過調節細胞焦亡影響膿毒癥誘導的急性腎損傷。
大鼠膿毒癥模型
LPS-EP (Standard)
靜脈給藥2.5 μg/kg BW
26149990
應用:人參皂苷Rg1和Re通過與TLR4結合來對LPS誘導的膿毒癥起預防作用。
大鼠牙周炎模型
LPS-PG (Standard)
牙齦內注射10 μg
30665148
應用: LPS-PG誘導的牙周炎模型的血清中Aβ肽水平升高。
小鼠牙周炎模型
LPS-PG  (Standard)
牙齦內注射0.5mg/kg BW
34342041
應用:Th17/Treg失衡調節牙周炎所致的認知功能障礙
小鼠腦炎模型
LPS-PG (Standard)
腹腔注射5mg/kg BW
36240654
應用:丙咪嗪可以抑制LPS-PG誘導的小膠質神經毒性。


備注:

LPS-EB Ultrapure (Cat. Code: tlrl-3pelps)  LPS-EB VacciGradeTM  (Cat. Code: vac-3pelps)(表中紅色標記)是InvivoGen獨-家提供的產品。如需購買,請聯系Invivogen代理商欣博盛生物~


不同疾病模型的protocol





*LPS誘導急性肺損傷(ALI)模型 PMID: 35544597  LPS-EB (Standard)

小鼠模型的建立:

1. 每只小鼠氣管給藥LPS(standard)10μg。

2. 在LPS處理前24h,給小鼠施用MO(包括Reg1-MOs組和control MO組)。

3.  LPS處理6h后,麻醉小鼠并采集樣本。

小鼠模型的應用:

評價Reg1-MOs對LPS誘導的ARDS的體內治療效果。


*“Two-hit" 模型(LPS和MV誘導的ALI模型) PMID: 24007300  LPS-EB Ultrapure

小鼠模型的建立:

1LPS-EB Ultrapure經氣管給藥,濃度為100 μg/ml,劑量為2 μl/g BW。

2. LPS處理90min后,將小鼠麻醉進行機械通氣(MV)。小鼠經氣管插管并通氣共4小時。

3. MV結束后,對小鼠實施安-/樂-死以收集樣本。

小鼠模型的應用:

驗證LPS和MV可導致IL-1β分泌和ALI發展的假設,該過程依賴于NLRP3炎性小體的激活。





*LPS誘導敗血癥模型 PMID: 30808756 LPS-EB Ultrapure  LPS-EB VacciGradeTM

小鼠模型的建立:

1. 膿毒癥模型:腹腔注射LPS-EB Ultrapure 6 mg/kg BW。

2. 無菌(GF) 小鼠膿毒癥模型:腹腔注射50 mg/kg BW的LPS-EB VacciGradeTM

小鼠模型的應用:

1. 膿毒癥模型:探討西方飲食(western diet ,WD)對膿毒癥的影響。

2. GF小鼠膿毒癥模型:測定WD依賴性膿毒癥對菌群的依賴性。





*LPS誘導牙周炎模型 PMID: 30665148 LPS-PG (Standard)

小鼠模型的建立:

1. 雙側上頜第一、第二磨牙間的腭側牙齦注射10 μl濃度為1mg /ml的 LPS-PG (Standard)

2. 注射后,每隔48小時再注射兩次。

3. 誘導過程持續14 d,每側共注射 LPS-PG (Standard)6次。

小鼠模型的應用:

測定牙周炎動物模型中β淀粉樣蛋白(Aβ)肽的循環水平。




備注:

標記為紅色的產品均來自InvivoGen。這些數據是基于InvivoGen品牌的高品質 LPS生成的,由于已知的TLR2交叉污染的影響或批次間內毒素水平的不準確評估,這些數據可能不適用于來自其他供應商的低質量LPS。


產品信息

產品

貨號

規格

LPS-EB (Standard)

tlrl-eblps

5 mg

LPS-EB Ultrapure

tlrl-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-EB VacciGradeTM

vac-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-PG (Standard)

tlrl-pglps

1mg




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